• 歡迎來到北京博奧森生物技術有限公司網站!
    咨詢熱線

    18610944007

    當前位置:首頁  >  產品中心  >  常用試劑  >  普通試劑  >  C-0013Western及IP細胞裂解液

    Western及IP細胞裂解液

    簡要描述:Western及IP細胞裂解液
    本產品裂解細胞獲得的裂解產物,可用于PAGE,蛋白印跡(Western Blot),免疫沉淀(immnolprecipitation,IP),免疫共沉淀(co-IP) 和蛋白與多肽的分離純化。

    • 產品型號:C-0013
    • 廠商性質:生產廠家
    • 更新時間:2022-04-08
    • 訪  問  量: 57

    相關文章

    Related Articles

    詳細介紹

    品牌自營品牌貨號C-0013
    供貨周期現貨應用領域醫療衛生,化工,生物產業,制藥

    Western及IP細胞裂解液

    保存條件 Store at -20℃ stable for 12 months.

    Western及IP細胞裂解液

    產品簡介

    WIP組織細胞裂解液(Tissue and Cell lysis solution for Western Blot and Immunoprecipitation ),是一種在非變性條件下裂解細胞的裂解液。本產品裂解細胞獲得的裂解產物,可用于PAGE,蛋白印跡(Western Blot),免疫沉淀(immnolprecipitation,IP),免疫共沉淀(co-IP) 和蛋白與多肽的分離純化。

    WIP裂解液的主要成分為Tris(pH 7.5,20mM),150mM NaCl,去垢劑Triton X-100以及多種蛋白酶抑制劑,無需自備PMSF、磷酸酶抑制劑等蛋白酶抑制劑。WIP不僅可以用于細胞培養物的裂解,也可直接用于大多數動物組織的裂解。在有效地裂解組織和細胞的同時,可強烈地抑制蛋白、多肽的降解,并保持原有的分子結構和蛋白間相互作用。

    用WIP裂解得到的組織細胞蛋白樣品,可以用博奧森生產的BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的Triton X-100等干擾物質,不能用Bradford試劑盒測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。


    包裝清單

    WIP組織細胞裂解液        30ml

    PMSF(100X)             0.3ml


    保存條件:

    -20°C保存,一年有效。


    注意事項:

    1.為獲得最佳的實驗效果,可適當分裝使用,以盡量避免反復凍融。

    2.PMSF應現用現加。

    3.裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或4°C進行。

    4.蛋白酶抑制劑均有較高的毒性,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。一旦直接接觸,請立即用流水沖洗,再向醫療保健結構咨詢。



    二.使用方法說明

    1.培養細胞

    取出WIP裂解液,待融化后,顛倒混勻數次,適量分裝凍存。在使用前取出,按比例加入PMSF(使其最終濃度為1mM),混勻,立即使用。

    貼壁細胞,去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗2-3遍(如血清中的蛋白沒有干擾,也可以不洗)。按6孔板每孔加入100-200微升的比例加入WIP。用槍吹打數下,使WIP和細胞充分接觸。通常WIP接觸細胞數秒后細胞就會被裂解。

    懸浮細胞,收集培養細胞,離心去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗2-3遍(如血清中的蛋白沒有干擾,也可以不洗),用手指把細胞用力彈散,按6孔板每孔細胞加入100-200微升的比例加入WIP。如果細胞數量較大,應按50-100萬細胞/管分裝或根據細胞數量按比例增加WIP。用手指輕彈管底以促進WIP和細胞充分接觸,裂解完全時應無明顯的細胞顆粒。

    裂解物經10,000-14,000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

    裂解液用量說明:通常6孔板每孔細胞加入100微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到150微升或200微升。

    2.組織樣品

    取Ep管,分別稱重標記,把組織切成小塊裝入Ep管中,稱重。按每20毫克組織加100-200微升的比例加入WIP(如裂解不完全,可以適當增加WIP的用量;如需要的蛋白樣品濃度較高,可以適當減少WIP的用量)。用手握式電動組織細胞勻漿器勻漿約1分鐘或直至充分裂解。10,000-14,000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

    如果組織樣品本身非常細小,如淋巴細胞,可直接加入WIP裂解,通過振蕩(Vortex)以使樣品裂解完全


     


    產品咨詢

    留言框

    • 產品:

    • 您的單位:

    • 您的姓名:

    • 聯系電話:

    • 常用郵箱:

    • 省份:

    • 詳細地址:

    • 補充說明:

    • 驗證碼:

      請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7
    日本厕所间谍偷窥撒尿,www.色小姐,丁香五月婷,av专区
    掃一掃訪問手機站掃一掃訪問手機站
    訪問手機站